安全的法医DNA分析需要一些不仅好的工具。VERSA 1100自动化工作站自动化Quantifier ® Trio DNA定量试剂盒,使手动协议更流畅、更快。这种技术赋予了法医实验室的效率和可靠性。
Quantifier®Trio DNA定量试剂盒专为法医DNA分析而设计。它提供了一个全面的解决方案,可以同时量化三个关键的遗传目标:人类DNA、男性DNA和总DNA,从而能够更深入地了解样本组成,并有助于解释复杂的法医样本。一旦从生物样本中分离出DNA,测量可扩增的人类DNA就成为DNA分析的关键。Quantifier®Trio试剂盒提供了一种简单的方法来准确测量人类和男性的DNA浓度,即使低至5 pg/μL。以下将介绍关于如何使用Quantifier®Trio试剂盒对定量反应的自动化制备和处理。
VERSA的盘面布局
VERSA液体处理工作站关联了Quantifier®Trio DNA定量试剂盒应用。这种特殊的盘面布局设计最多可容纳96个样本。它可以很容易地扩展到远远超过这一点,用于高吞吐量流程的多板自动化。48个样本的总运行时间约为11分钟。
VERSA盘面布局包括以下模块
- 带移盘夹的8通道移液管头
- VERSA系列带紫外线荧光灯的高效空气过滤器罩
- 20µl、200µl和1000µl移液管墙头和的盘位。
- Quantifier ®Trio DNA定量试剂盒试管的试剂块冷却器。39个位置较冷:用于在4°C下储存缓冲液、试剂和酶。0.2mL有16处,0.5mL有12处,1.5mL有5处,5-7mL有6处。
- 冷却器/加热器平板(4°C-90°C)
- 8孔特殊试剂槽
VERSA软件
VERSA100工作站由用户友好的VERSAware软件提供动力,该软件具有盘面布局,允许用户从现有实验室软件库中选择板材类型。可以使用基于动作的命令库中的拖放功能创建或修改软件脚本。这些功能使得用户可以根据需要轻松地创建和修改脚本。然而,对于已经预先编程的Quantifier®Trio DNA定量试剂盒工作流程,无需修改。预编程的工作流程旨在与VERSA100平台无缝协作,并可通过软件界面轻松访问。
简化的工作流程
VERSA 1100将DNA定量过程转换为无缝的自动化工作流程。从样品制备到定量,这种集成最大限度地减少了手动干预,显著减少了人为错误并很大限度地提高了吞吐量。它可以根据仪器通道(4或8通道压头)从24个样本开始配置,直到96个井格式——实际吞吐时间将取决于所涉及的具体程序和步骤。实验室现在可以在很短的时间内处理更大的样本量,并获得一致可靠的结果。
步骤 | 位置(从_到_) | 体积 | 时间 (48 样本) |
初步混合 | 试剂冷槽-试剂冷槽 | 8 μL | 1 分钟 |
反应混合 | 试剂冷槽-试剂冷槽 | 10 μL | 1分钟 |
将主混合物加入试管中试剂 | 试剂冷槽-试剂冷槽 | 18 μL | 3.5分钟 |
将PCR混合物分配到PCR板的每个孔中 | 试剂冷槽- PCR 板 | 18 μL | 2.5分钟 |
将样品、标准品或对照品添加到适用的孔或管中(换头器) | 样品板- PCR 板 | 2 μL | 3分钟 |
以3000rpm离心板约20秒,并在7500实时PCR仪器上运行板 | 盘面以外 |
自动化运行结束后,标准品和样品DNA管进行手动混合、离心,然后测定样品DNA的浓度。
结果
该自动定量器方案产生准确且可重复的DNA定量结果。作为QC(质量控制)测试的一部分,许多自动Quantifier运行与手动Quantifier方法并排进行比较。相应测量的DNA浓度在Qubit荧光计的误差范围内。因此,我们相信,就结果的准确性而言,自动化DNA定量相当于手动定量。
此外,这种自动化方法显著降低了手动程序中出现错误的可能性。虽然熟练的实验室技术人员和分析师可以非常准确地执行Quantifier流程,但当这些协议应用于大量样本时,其重复性可能会导致精神疲劳,可能导致偶尔的操作错误。这些重复的任务可以通过自动液体处理工作站有效地进行。
最终,使用自动化进行DNA定量可以让实验室研究人员将时间分配给其他关键的、更高价值的任务。通过使用VERSA系列节省了大量时间。
VERSA系列可以自动安装不同的试剂盒:
- Quantifier Trio DNA定量试剂盒:应用生物系统™
- Quantifier HP DNA定量试剂盒:Applied Biosystems™
- Qubit dsDNA定量分析试剂盒:InvitrogenTM
- PowerQuant™系统:Promega
- PowerPlex®Fusion系统:Promega
结论
Aurora VERSA 1100自动液体处理工作站上Quantifier® Trio DNA定量试剂盒的自动化提供了一种高通量定量解决方案,减少了操作时间和人为错误,48个样本设置的总运行时间仅为11分钟。VERSA液体处理系统的优点是具有用户友好的界面,可灵活选择将文库数量、qPCR重复次数和稀释因子修改为所需的实验设计,每次运行最多96个样本。用于定量研究的可靠、优化和完全现成的综合解决方案。