固相萃取常见问题之回收率低
近年来,固相萃取技术得到快速发展,已广泛应用在食品安全、药品分析、环境检测等领域,凭借高效、可靠、试剂消耗少等优点成为样品前处理的有效手段。但是,用户在使用固相萃取时会遇到各种各样的问题,如回收率低。
固相萃取基本流程包括:活化(即柱子预处理)、上样、淋洗、洗脱及分析物收集。
当出现“目标物没有回收或回收率低”时,可向样品溶液中添加标液,再进行完整的SPE操作,将样品流出液、淋洗液和洗脱液分别收集并分析,以查找目标分析物在哪个环节流失了。目标化合物在吸附剂上保留不足;目标化合物未被完全洗脱;其他环节。
图一:回收率低
1、目标化合物在过SPE柱时未全部保留在萃取柱上,与样液一起流出萃取柱:
具体原因 | 解决方法 |
① SPE柱选择不合适 | 选择对目标物有合适保留强度的SPE柱 |
② 样品溶剂和淋洗液的洗脱梯度过强 | 降低样品溶剂淋洗液的洗脱强度 |
③ 样品溶液体积或浓度过高,发生“穿透” | 降低上样量或增加分离柱填充料量 |
④ SPE柱未进行有效的预处理 | 加入溶剂进行活化和平衡 |
2、目标化合物未被完全洗脱,仍保留在萃取柱上:
具体原因 | 解决方法 |
① 分离柱对化合物保留过强,未找到合适的洗脱溶剂 | 选择对目标物有合适保留强度的SPE柱 |
② 洗脱液洗脱强度不够 | 提高洗脱液的洗脱强度 |
③ 洗脱液体积小 | 增加洗脱液体积 |
3、其他操作环节:
具体原因 | 解决方法 |
① SPE前的提取效率不足 | 选择合适的提取溶剂 |
② 前处理步骤太繁琐,目标化合物损失 | 适当简化前处理步豫 |
③ 目标物挥发性太强,在浓缩步骤损失 | 调整浓缩方式 |
④ 目标化合物在前处理溶剂中分解 | 掌握目标化合物的稳定性,调整溶剂体系 |
自动化固相萃取工作站
AURORA VERSA固相萃取工作站配置特有的试剂喷加器和试剂冷槽,前者适用体积液体快速精准添加,后者在萃取过程中有效保存样品和试剂,有效防止挥发性溶剂;保护实验室环境和人员安全。VERSA固相萃取工作站,最大可达15个盘面,达到高通量全自动化萃取需求。液体处理工作站在血液/血清维生素D分离纯化、法医药物滥用研究、药物组分研究、尿液异黄酮分离纯化、食品安全等方面均有成熟运用。